2-8℃

1.开盖后组份按要求条件保存。
2.拆封后请尽快使用完！

一年

紫外分光光度计

真菌菌丝、谷物等

1. 紫外分光光度计
2. 低温离心机
3. 水浴锅
4. 移液器
5. 冰箱

1. 纯水
2. 蛋白定量试剂盒

1. 离心管
2. 吸头
3. 一次性手套
4. 1mL 石英比色皿

1. 正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
2. 麦角甾醇对光、热、氧气敏感，易氧化分解，全程操作需避光，使用棕色容器，尽量缩短操作时间，避免强光直射和高温长时间处理。
3. 紫外分光光度计需定期检定，测定前完成波长校正；比色皿使用前用溶剂润洗 3 次，透光面无指纹、无气泡，避免交叉污染。
4. 本方法为快速筛查方法，仅用于科研。仲裁、检验、低含量样品检测，需采用高效液相色谱法。

样品前处理
1. 样品粉碎与称量：取固体样品（如真菌菌丝、谷物），用粉碎机粉碎过 40 目筛，精确称取 0.5~5.0 g 样品粉末，置于 5 mL 离心管中。
2. 提?。杭尤?2 mL 提取贝博试剂A，涡旋振荡 1min 混匀。
3. 将离心管置于 60℃水浴/金属浴/气浴中孵育30 min。
4. 在12000×g 离心 10 min，弃沉淀，取上清液。
5. 在上清液中加入0.5 ml 试剂B，充分混匀。
6. 置于 60℃水浴/金属浴/气浴中孵育10 min。
7. 在16000×g 离心 15 min，弃沉淀，取上清液待测。


标准曲线制作
1. 标准储备液配制：
将麦角甾醇标准品用10 ml标准品溶解液C2溶解并定容至刻度，摇匀，得到浓度为 100 μg/mL 的标准储备液。
2. 用无水乙醇稀释浓度100 μg/mL 的标准储备液，得到浓度为 2、4、6、8、10、12 μg/mL 的系列标准工作液。
3. 测吸光度：以标准品溶解液C2为空白对照，设置紫外分光光度计波长为 282 nm，待仪器稳定后，依次测定系列标准工作液的吸光度（A 值）。
4. 绘制标准曲线：以标准工作液浓度（c，μg/mL）为横坐标，对应的吸光度（A）为纵坐标，用 Origin 或 Excel 绘制散点图，进行线性回归分析，得到回归方程

样品提取液吸光度测定
以无水乙醇为空白对照，在 282 nm 波长下，测定步骤一中制备的样品提取液的吸光度（A 样），平行测定 3 次，取平均值。


含量计算
1. 将样品提取液的平均吸光度（A 样）代入标准曲线回归方程，计算出样品提取液中麦角甾醇的浓度（C样，μg/mL）。
2. 再按以下公式计算样品中麦角甾醇的含量（μg/g）